细胞冻存的致命误区,你中了几个?
1、细胞气象欠安就冻存
✅ 正确作念法:冻存前确保细胞处于对数滋永恒(80%-90%汇合度),幸免使用老化或过度滋长的细胞。活力不及的细胞诞生和抗毁伤才智弱,易受低温、冰晶等因素伤害,复苏后多量物化。
2、 细胞消化不当,导致冻存时毁伤
✅ 正确作念法:使用和煦消化酶,消化工夫不宜过长ag百家乐规律,幸免细胞膜毁伤。同期消化也要透彻ag百家乐规律,幸免细胞消化工夫不及,使劲奏乐零星导致细胞膜毁伤。并添加实足量隔断液隔断消化。
3、冻存细胞悬液浓渡过高或过低
✅ 正确作念法:保举冻存密度:1×10⁶~5×10⁶ cells/mL(过低易物化,过高易形成冰晶毁伤)。冻存前用台盼蓝染色检测活率(>90%方可冻存)。
4、 复苏时操作不当,热休克或DMSO毒性
✅ 正确作念法:快速复苏(37℃水浴,摇晃冻存管1-2分钟内十足熔化)。DMSO需尽快洗脱(熔化后立即加入实足量十足培养基稀释)。幸免反复冻融!苛刻1ml冻存液添加3ml十足培养基稀释。
5、永恒储存时温度波动
✅ 正确作念法:-80雪柜减少开关,并只短期包3个月内保存。液氮罐保存的需要如期补充液氮,幸免温度回升。使用温度监控系统(如无线液氮罐传感器)。
以下是我司经过2年研发,推出让细胞穿越时空的"生命方舟"的冻存液,
AG真人百家乐让您的细胞冻存后终了有活率高达95%,快来加入咱们吧!
自配经典配方:货号CSP169
1、胎牛血清(FBS)+DMSO(二甲基亚砜),DMSO可裁减冰点,减少冰晶形成。
冻存姿首:(4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃ 过夜 → 液氮永恒保存)
生意化冻存液:货号CSP042
1、含 DMSO: 葡萄糖等多样细胞养分要素,培植细胞存活率和活力,亦稳妥于无血清培养细胞和卵白抒发细胞。
2、无血清细胞冻存液(无DMSO):货号CSP207
无DMSO有机试剂要素,无需秩序性降温。该冻存液中所含的独到的冷冻保护剂,不仅能替代传统冻存液的DMSO要素,裁减对细胞的潜在毒性,还能在冷冻历程中减速冰晶对细胞以及细胞间相互挤压的影响,灵验减少冷冻历程中冰晶形成对细胞结构酿成的毁伤,此外,独特冷冻保护剂具备优异的生物相容性,使细胞可在-80℃条目下永恒壮健保存。
冻存姿首:无需秩序性降温,可径直飞动到-80度保存或液氮保存。